产品货号：
SNM184
中文名称：
乳酸检测试剂盒
英文名称：
Lactic Acid assay kit
产品规格：
50管/48样
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒采用比色法测定血清、组织、细胞、发酵液、培养液等样品中的乳酸含量。
以NAD+为氢受体，LDH催化乳酸(Lactic Acid)脱氢产生丙酮酸，使NAD+转化成NADH。其中PMS递氢使NBT还原为紫色呈色物，呈色物的吸光度在530nm时与乳酸含量成线性关系。
乳酸是糖无氧氧化(糖酵解)的代谢产物。乳酸产生于骨胳，肌肉，脑和红细胞。经肝脏代谢后由肾分泌排泄。血乳酸测定可反映组织氧供和代谢状态以及灌注量不足。乳酸水平的增高可见于多种临床疾病。
按下表加入各成分并进行相应操作：
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以NAD+为氢受体，LDH催化乳酸(Lactic Acid)脱氢产生丙酮酸，使NAD+转化成NADH。其中PMS递氢使NBT还原为紫色呈色物，呈色物的吸光度在530nm时与乳酸含量成线性关系。
乳酸是糖无氧氧化(糖酵解)的代谢产物。乳酸产生于骨胳，肌肉，脑和红细胞。经肝脏代谢后由肾分泌排泄。血乳酸测定可反映组织氧供和代谢状态以及灌注量不足。乳酸水平的增高可见于多种临床疾病。
- 快速简便：全程约30分钟，可测50例左右样本。
- 取样量微：本法取样量20μL～50μL即可
- 稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
- 再现性好：变异系数CV=1.7%。
- 回收试验：X =100%。
- 受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
- 测试面广：可测动物血清(浆)、组织、发酵液、培养细胞、培养细胞上清、红细胞等。
| 组分 | 规格 | 保存 |
| 试剂一：酶稀释液 | 60mL | 2～8℃可保存6个月 |
| 试剂二：酶储备液 | 0.6mL | 2～8℃可保存6个月 |
| 试剂三：黄色透明液体 | 2×6mL | 2～8℃避光可保存6个月 |
| 试剂四：粉剂 | 2支 | 4～8℃可保存1个月，长期保存请置于-20℃ |
| 试剂五：终止液 | 2×60mL | 2～8℃可保存6个月 |
| 试剂六：标准品(3mmol/L) | 2mL | 2～8℃可保存6个月 |
- 721或722等可见光分光光度计（有对应波长的酶标仪或半自动生化分析仪）
- 37℃恒温水浴箱或气浴箱
- 漩涡混匀器
- 微量移液器
- 血清、血浆、组织块置于冰箱-20℃冷冻，可保存1个月左右；-70℃冷冻可保存2～3个月。温度越低保存时间越长。解冻后的样本或组织匀浆必须当天测定。
- 严重溶血及黄疸会使得测定结果偏高。
- 在批量实验前需要进行预实验，以确定绝对OD(测定OD值—空白OD值)在0.05～0.35之间。如果测定绝对OD小于0.05，则需要加大样本浓度重新测定；如果测定绝对OD大于0.35，则需要将样本稀释后重新测定。
- 本试剂盒也可用酶标仪读数：波长530nm，去反应液250μL，酶标仪读数即可。
- 酶工作液：临用前将试剂二（酶储备液）和试剂一（酶稀释液）按照1︰100的体积比进行混合，现用现配，2～8℃保存24小时内有效。
- 显色剂：使用前取试剂四粉剂1支倒入1瓶试剂三液体中，待粉剂全部溶解后，用微量移液器取少许液体打入小离心管中，反复颠倒离心管，再用微量移液器将离心管中的液体转移到瓶中，如此反复2～3次，使二者充分混合，配成显色剂，2～8℃避光保存2周内有效。
- 血清、血浆、培养液等样本
取血清(浆)、培养液用生理盐水稀释成不同浓度，按操作表做预实验，选择绝对OD值(测定OD值—空白OD值)在0.05～0.35之间的浓度为最佳取样浓度。 - 动物组织样本
组织样本准确称取质量，按样本质量(g):生理盐水体积=1:9的比例混合，冰水浴条件下，2500转/分机械匀浆10分钟，取上清液（10%匀浆上清）进行测定。将10%匀浆上清用生理盐水稀释成不同浓度，按操作表做预实验，选择绝对OD值(测定OD值—空白OD值)在0.05～0.35之间的浓度为最佳取样浓度。 - 培养细胞、细菌、植物组织
常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
- 按步骤加入样本、酶工作液、显色剂。
- 漩涡混匀，37℃孵育10分钟。
- 加入终止剂终止反应。
- 530nm波长，1cm光径，比色。
按下表加入各成分并进行相应操作：
| 成分 | 空白管 | 标准管 | 测定管 |
| 双蒸水（ml） | 0.02 | ||
| 3mmol/L标准品（ml） | 0.02 | ||
| 待测样本（ml） | 0.02 | ||
| 酶工作液（ml） | 1 | 1 | 1 |
| 显色剂（ml） | 0.2 | 0.2 | 0.2 |
| 混匀，37℃水浴准确反应10分钟 | |||
| 终止液（ml） | 2 | 2 | 2 |
| 混匀，波长530nm，1cm光径，双蒸水调零，测各管吸光度值。 | |||
- 血清、血浆、培养液等样本
乳酸含量 ＝ OD测定—OD空白 × 标准品浓度 ×样本测试前稀释倍数 (mmol/L) OD标准—OD空白 (3mmol/L) - 组织样本
组织乳酸含量 ＝ OD测定—OD空白 × 标准品浓度 ÷ 待测样本蛋白浓度 (mmol/gprot) OD标准—OD空白 (3mmol/L) (gprot/L)
注：prot为蛋白的意思
- 用生理盐水按1:1比例2倍稀释血清，取0.02mL按步骤操作，测得空白管OD值为0.076，标准管吸光度值为0.384，测定管吸光度值为0.304，计算如下：
乳酸含量 ＝ OD测定—OD空白 × 标准品浓度 ×样本测试前稀释倍数 (mmol/L) OD标准—OD空白 (3mmol/L) ＝ 0.304—0.076 ×3×2＝4.442mmol/L 0.384—0.076 - 用生理盐水按4:1比例5倍稀释培养液，取0.02mL按步骤操作，测得空白管OD值为0.076，标准管吸光度值为0.384，测定管吸光度值为0.193，计算如下：
乳酸含量 ＝ OD测定—OD空白 × 标准品浓度 ×样本测试前稀释倍数 (mmol/L) OD标准—OD空白 (3mmol/L) ＝ 0.193—0.076 ×3×5＝5.698mmol/L 0.384—0.076 - 取5%的小鼠肝组织匀浆液0.02mL，按步骤操作，测得空白管OD值为0.076，标准管吸光度值为0.384，测定管吸光度值为0.357。同时测得5%肝组织匀浆蛋白浓度为7.006gprot/L，计算如下：
组织乳酸含量 ＝ OD测定—OD空白 × 标准品浓度 ÷ 待测样本蛋白浓度 (mmol/gprot) OD标准—OD空白 (3mmol/L) (gprot/L) ＝ 0.357—0.076 ×3÷7.006＝0.391mmol/gprot 0.384—0.076 - 取2%的猪肌肉组织匀浆液0.02mL，按步骤操作，测得空白管OD值为0.076，标准管吸光度值为0.384，测定管吸光度值为0.154。同时测得2%肌肉组织匀浆蛋白浓度为1.1019gprot/L，计算如下：
组织乳酸含量 ＝ OD测定—OD空白 × 标准品浓度 ÷ 待测样本蛋白浓度 (mmol/gprot) OD标准—OD空白 (3mmol/L) (gprot/L) ＝ 0.154—0.076 ×3÷1.019＝0.746mmol/gprot 0.384—0.076
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